شناسایی جدایه های بتا2 مثبت کلستریدیوم پرفرنجنس در تیپهای a , b , c , d به روش مولکولی pcr

کلستریدیوم پرفرنجنس یک باکتری بیهوازی ،گرم مثبت ، هاگدار است. کلستریدیوم پرفرنجنس یک عامل مهم بیماری روده ای در انسانها و حیوانات خانگی است. این باکتری توکسین های مختلفی تولید می کند که بر اساس تولید توکسین های ? ،? ،? ، ? به پنج بیوتایپ a-e تقسیم بندی می شود . توکسین ?2 در تعیین تیپ ژنتیکی کلستریدیوم پرفرنجنس نقشی ندارد ولی به دلیل پاتوژن بودن آن دارای اهمیت زیادی است . برای شناسایی جدایه های ?2 مثبت کلستریدیوم پرفرنجنس در تیپهای a-d در ایران ، در موسسه واکسن و سرم سازی رازی کرج ، با استفاده از59 نمونه موجود در کلکسیون میکروبی بخش بیهوازی از طریق روش مولکولی pcr سیسنمی راه اندازی شد . ابتدا شرایط pcr برای تکثیر قطعه bp 566 از ژن ?2 بهینه سازی شد و با این روش وجود یا عدم وجود ژن ?2 در مجموع نمونه های موجود مورد ارزیابی قرار گرفت .نتایج نشان داد که فراوانی این توکسین در تیپهای مختلف کلستریدیوم پرفرنجنس که برای اولین بار در ایران گزارش می شود به این شرح بود: تیپ a ( 11 نمونه ) : 5/54 % ، تیپ b : 21 نمونه ) : 62% ، تیپ c ( 14 نمونه ) : 8/42 % ، تیپ d ( 13 نمونه ) : 2/69% بوده است . بیش از نیمی از نمونه های کلستریدیوم پرفرنجنس موجود ایرانی دارای ژن کد کننده توکسین ?2 بودند ، توالی یابی این ژن درتعدادی از سویه های مثبت به منظور تائید نتایج حاصل از pcr ونیز بررسی پلی مورفیسم موجود در ژن انجام شد. آنالیز توالی های بدست آمده نشان دهنده حضور پلی مورفیسم قابل توجه در بین جدایه ها بود. با توجه به فراوانی بالای ژن ?2 در جدایه های مطالعه شده انجام مطالعات تکمیلی روی توکسین مذکور بعنوان یکی از عوامل ویرولانس پیشنهاد می شود.